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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔結腸成纖維細胞
產(chǎn)品簡介：
兔結腸成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品：LHX3蛋白抗體 四分子交聯(lián)體4/四旋蛋白4/四次跨膜蛋白4抗體 Sema6A抗體 兔腦膜細胞 人肝外膽管上皮細胞 NCI-H647人非小細胞肺癌細胞 RD (人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質：經(jīng)銷商
訪問量：88
更新時間：2024-10-31
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔結腸成纖維細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
結腸 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7973 |
細胞簡介：
兔結腸成纖維分離自結腸組織；結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結締組織），肌層（內環(huán)形、外縱行兩層平滑?。饽ぃɡw維膜或漿膜）。結腸成纖維細胞主要分布于外膜（纖維膜或漿膜）結締組織內。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的結腸成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
實驗室分離的兔結腸成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔結腸成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔結腸成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
線粒體呼吸鏈復合體Ⅱ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
線粒體呼吸鏈復合體Ⅲ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
α戊二酸脫氫酶（α-KGDH）試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒
Rat endothelial niic oxide syhase (eNOS) ELISA Kit 大鼠內皮型合成酶(eNOS)試劑盒
Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)試劑盒 進口分裝
HumanapoproteinB100,apo-B100試劑盒人載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒
植物葉綠體總蛋白定量試劑盒20次
Humaissue-typePlasiminogenActilyse，t-PAELISAKit人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒
RNA相關結合蛋白MCG10抗體
磷酸化p38調節(jié)/激活蛋白激酶抗體
IL36A重組小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白 Protein
ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關蛋白抗原 0.5mgADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關蛋白抗原
PROK1重組人 EG-VEGF / prokineticin-1 蛋白 (His 標簽) Protein
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽), Biotinylated
EPHA4 Protein Rat 重組大鼠 EphA4 蛋白
ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關蛋白抗原 0.5mgADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關蛋白抗原
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽), Biotinylated
IL36A重組小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白 Protein
EPHA4 Protein Rat 重組大鼠 EphA4 蛋白
PROK1重組人 EG-VEGF / prokineticin-1 蛋白 (His 標簽) Protein
兔結腸成纖維細胞大鼠類固醇5α還原酶2(SRD5α2)試劑盒 ，英文名： SRD5α2 ELISA Kit
Mouse free three iodothyronine (Free-T3) ELISA Kit 小鼠游離三甲狀腺原(Free-T3)試劑盒
Ratai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 大鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforGABAELISAKit大鼠γ氨基
細胞過氧化氫酶(CATALASE)催化活性比色法定量試劑盒20次
RatProgesteronereceptor,PROGRELISAKit小鼠孕同受體(PROGR)試劑盒
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
