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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)
產(chǎn)品簡介：
人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品：KIAA1310蛋白抗體 STAC2蛋白抗體 環(huán)指蛋白23抗體 人小腸黏膜上皮細(xì)胞 人牙齦成纖維細(xì)胞 sNF96.2人1型神經(jīng)纖維瘤細(xì)胞 NCI-H209 [H209] (人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：53
更新時間：2024-10-30
產(chǎn)品特性Product characteristics
人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
外周血 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 樹突狀 | YS-01X7542 |
細(xì)胞簡介：
人外周血DC分離自外周血，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。DC細(xì)胞，全稱樹突狀細(xì)胞(DC)，是近年來倍受們關(guān)注的專職抗原呈遞細(xì)胞(APC)，能攝取、加工及呈遞抗原，啟動T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。由美國學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn)，從脾臟中分離出一類與粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞，因其細(xì)胞膜向外伸出，形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹狀突起，故而命名為樹突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞，處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。
方法簡介：
公司實驗室分離的人外周血DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 樹突狀
傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豚鼠端粒酶試劑盒 豚鼠端粒酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豚鼠端粒酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠端粒酶試劑盒、豚鼠端粒酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒、豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
豚鼠促卵泡素試劑盒 豚鼠促卵泡素試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豚鼠促卵泡素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠促卵泡素試劑盒、豚鼠促卵泡素eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
豚鼠表皮生長因子試劑盒 豚鼠表皮生長因子試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豚鼠表皮生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠表皮生長因子試劑盒、豚鼠表皮生長因子eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA 試劑盒
Human glycated albumin (GA) ELISA Kit 人糖化白蛋白(GA)試劑盒
HumanHomocysteicacid,HcyELISAKit 人同型半胱(Hcy)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanBence-Jonesprotein,BJP試劑盒人本周蛋白(BJP)試劑盒
植物種子活性葉綠體分離試劑盒20次
Humaarate-resistaacidphosphatase5b，ACP-5bELISAKit人抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒
自然殺傷凝集素樣受體G2抗體
表皮生長因子受體III型突變體抗體
CA9重組小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ATF1 (Activating Transcription Factor1 0.5mgATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化復(fù)制因子1
CCL24重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FLT1 Protein Human 重組人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD302 Protein Rat 重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白
ATF1 (Activating Transcription Factor1 0.5mgATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化復(fù)制因子1
FLT1 Protein Human 重組人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CA9重組小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD302 Protein Rat 重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白
CCL24重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)大鼠神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(P1)試劑盒 ，英文名： P1 ELISA Kit
Mouse cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)試劑盒
Rat25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISAKit 大鼠25羥D3(25(OH)D3/25HVD3)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHBeAg(立可讀)乙型肝e抗原
細(xì)胞半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Reatserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit大鼠絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
