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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人食管平滑肌細胞
產(chǎn)品簡介：
人食管平滑肌細胞公司正在出售的產(chǎn)品：鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體 FBXO24蛋白抗體 環(huán)指蛋白113B抗體 人髓母細胞瘤組織源細胞 人直腸癌組織源細胞 SNU-228人腎細胞癌細胞 PLC/PRF/5 (人肝癌亞力山大細胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：48
更新時間：2024-10-30
產(chǎn)品特性Product characteristics
人食管平滑肌細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
食管組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7129 |
細胞簡介：
人食管平滑肌分離自食管組織；食管可分為頸段、胸段和腹段，脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，肌層上1/3段為骨骼肌，下1/3為平滑肌，中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中，肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴格控制，食管還有括約肌，位于環(huán)狀軟骨水平的，稱為食管上括約肌；位于食管下端，一部分在膈上，穿過膈孔，另一部分在膈下的高壓帶，稱為食管下括約肌。食管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
方法簡介：
公司實驗室分離的人食管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人食管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠水通道蛋白試劑盒 小鼠水通道蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠水通道蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠水通道蛋白試劑盒、小鼠水通道蛋白eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠抗試劑盒 小鼠抗試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠抗試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗試劑盒、小鼠抗eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠己糖激酶試劑盒 小鼠己糖激酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠己糖激酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠己糖激酶試劑盒、小鼠己糖激酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠β甘露糖苷酶試劑盒 小鼠β甘露糖苷酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠β甘露糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β甘露糖苷酶試劑盒、小鼠β甘露糖苷酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ovalbumin specific IgG (OVA sIgG) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)試劑盒
Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit 人0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)試劑盒 96T/48T 進口分裝
deoxypyridinoline,DPD試劑盒兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞線粒體復(fù)合物IV蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEndomeiumAibody,EMAbELISAKit小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒規(guī)格：96T/48T
著絲粒蛋白M抗體
SNAPC3蛋白抗體
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor 0.5mgShadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原
S100A6重組人 S100A6 / CACY 蛋白 Protein
CISD1 Protein Human 重組人 CISD1 / ZCD1 蛋白
IL35 Protein Human 重組人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 標簽)
Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor 0.5mgShadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原
CISD1 Protein Human 重組人 CISD1 / ZCD1 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
IL35 Protein Human 重組人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 標簽)
S100A6重組人 S100A6 / CACY 蛋白 Protein
人食管平滑肌細胞大鼠嗜鉻蛋白A(CHGA)試劑盒 ，英文名： CHGA ELISA Kit
Mouse vitamin D (VD) ELISA Kit 小鼠(VD)試劑盒
RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHDVIgM(HumanHepatitisDvirusIgM)ELISAKit人丁型肝IgM
細胞TEL激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitcath-K倉鼠組織蛋白酶K
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
