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基礎信息Product information
產品名稱：
人結腸黏膜上皮細胞
產品簡介：
人結腸黏膜上皮細胞公司正在出售的產品：肌動蛋白結合蛋白IPP抗體 FAM59A蛋白抗體 紅細胞膜蛋白4.2抗體 人顱蓋造骨細胞 兔乳腺成纖維細胞 VM-CUB-1人膀胱癌細胞 D341Med(人髓母細胞瘤細胞)
產品型號：
廠商性質：經銷商
訪問量：59
更新時間：2024-10-30
產品特性Product characteristics
人結腸黏膜上皮細胞
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
結腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7160 |
細胞簡介：
人結腸黏膜上皮分離自結腸組織；結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結締組織），肌層（內環(huán)形、外縱行兩層平滑?。?，外膜（纖維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細胞是機體內外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質和強度。探討正常結腸黏膜上皮細胞的分離、體外培養(yǎng)方法，為研究腸黏膜上皮細胞以及與腸黏膜相關疾病建立合適的細胞模型。
方法簡介：
公司實驗室分離的人結腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人結腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品：
小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肌球蛋白(MYS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 大鼠干細胞因子受體(SCFR)試劑盒
Humanchondroitinsulfate,CSELISAKit 人(CS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chicken17-ketosteroids,17-KS試劑盒雞17-同類固醇(17-KS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
遠西方雜交(FARWESTERNBLOT)印跡消除試劑盒20次
Mousehypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)試劑盒規(guī)格：96T/48T
醇結合蛋白4抗體
AF680標記的山羊抗人乙肝表面抗原抗體
EFNA1重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2 0.5mgASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原
NEIL1重組人 NEIL1 蛋白 Protein
CD63 Protein Human 重組人 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
THY1 Protein Rat 重組大鼠 CD90 / THY-1 蛋白
ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2 0.5mgASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原
CD63 Protein Human 重組人 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
EFNA1重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
THY1 Protein Rat 重組大鼠 CD90 / THY-1 蛋白
NEIL1重組人 NEIL1 蛋白 Protein
人結腸黏膜上皮細胞大鼠心肽(ANP)試劑盒 ，英文名： ANP ELISA Kit
Pla vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 植物B12(VB12)試劑盒
Mouseplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanai-IVIgGaibodyELISAKit人抗IVIgG抗體
細胞GRK4α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCRH大鼠促腎上皮質激素釋放激素
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
