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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
大鼠皮膚肥大細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
大鼠皮膚肥大細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：G蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白抗體 EHD4蛋白抗體 乙酰轉(zhuǎn)移酶9抗體 大鼠表皮角化細(xì)胞 豬心臟內(nèi)皮細(xì)胞 果蠅胚胎細(xì)胞；S2 NRK-52E (大鼠腎細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量：83
更新時(shí)間：2024-10-27
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠皮膚肥大細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細(xì)胞 | YS-01X7311 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠皮膚肥大分離自皮膚組織；皮膚肥大細(xì)胞廣泛分布于皮膚微血管周?chē)?，分泌多種細(xì)胞因子，參與免疫調(diào)節(jié)（T細(xì)胞、B細(xì)胞、APC細(xì)胞活化）。皮膚肥大細(xì)胞表達(dá)MHC分子、B7分子，具有APC功能。表達(dá)大量的IgE-Fc受體，釋放過(guò)敏介質(zhì)。具有弱吞噬功能，和血液的嗜堿粒細(xì)胞同樣，具有強(qiáng)嗜堿性顆粒的組織細(xì)胞。存在于血液中的這類(lèi)顆粒，含有肝素、組織胺、5-羥色胺，由細(xì)胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì)，可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)（炎癥）。由于在肥大細(xì)胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸，使細(xì)胞多陷于崩壞。肥大細(xì)胞呈圓形或卵圓形，細(xì)胞核小，呈圓形或橢圓形，染色淺，位于細(xì)胞中央。細(xì)胞常成堆或單個(gè)分布于血管附近。細(xì)胞呈圓形或卵圓形，細(xì)胞質(zhì)中充滿(mǎn)大小一致、染成藍(lán)紫色的顆粒，均勻分布在核周?chē)?/span>
方法簡(jiǎn)介：
見(jiàn)說(shuō)明
質(zhì)量檢測(cè)：
本公司生產(chǎn)的大鼠皮膚肥大采用膠原酶-混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；經(jīng)MCG-35免疫熒光鑒定，純度可達(dá)85%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
DMEM[H]、FBS、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人真核翻譯起始因子3a檢測(cè)試劑盒 人真核翻譯起始因子3a試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 人真核翻譯起始因子3a試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人真核翻譯起始因子3a試劑盒、人真核翻譯起始因子3a 檢測(cè)試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素檢測(cè)試劑盒 人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素試劑盒、人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素檢測(cè)試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
人粘膜相關(guān)上皮趨化因子檢測(cè)試劑盒 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒、人粘膜相關(guān)上皮趨化因子檢測(cè)試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
人早老素2檢測(cè)試劑盒 人早老素2試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 人早老素2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人早老素2試劑盒、人早老素2 檢測(cè)試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
豚鼠白介素5(IL5)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IL5 ELISA Kit
Human stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)檢測(cè)試劑盒
rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforaZP(Humanai-zonapellucidaaibody,aZP)ELISAKit人抗透明帶抗體
線(xiàn)粒體超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分離試劑盒50次
RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit兔抗平滑肌抗體(ASMA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
亞鐵氧化酶抗體
PE標(biāo)記人/小鼠CD45R單克隆抗體
NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
Proinsulin 胰島素原 0.5mgProinsulin 胰島素原
BAMBI重組人 BAMBI / NMA 蛋白 Protein
INSL4 Protein Human 重組人 INSL4 / EPIL 蛋白
TNFRSF21 Protein Human 重組人 DR6 / TNFRSF21 蛋白
Proinsulin 胰島素原 0.5mgProinsulin 胰島素原
INSL4 Protein Human 重組人 INSL4 / EPIL 蛋白
NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
TNFRSF21 Protein Human 重組人 DR6 / TNFRSF21 蛋白
BAMBI重組人 BAMBI / NMA 蛋白 Protein
大鼠皮膚肥大細(xì)胞豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒
Human tuberculosis aibody IgG (TB-Ab IgG) ELISA Kit 人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)檢測(cè)試劑盒
PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlpha-EP(HumanAlpha-Endomorphin)ELISAKit人α-內(nèi)肽
血液精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Phaseolusvulgarisagglinin,PHAELISAKit菜豆凝集素(PHA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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