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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔視網(wǎng)膜色素上皮細胞
產(chǎn)品簡介：
兔視網(wǎng)膜色素上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：賴氨酰氧化酶樣3抗體 鋅指蛋白20D3抗體 脂肪酸轉運蛋白5抗體 兔胃平滑肌細胞 人呼吸道上皮細胞 NCI-H1838人非小細胞肺癌細胞 HuT 102 (人T淋巴瘤細胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質：經(jīng)銷商
訪問量：52
更新時間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔視網(wǎng)膜色素上皮細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
視網(wǎng)膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7009 |
細胞簡介：
兔視網(wǎng)膜色素上皮分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內界膜。視網(wǎng)膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處最多。層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力。視網(wǎng)膜色素上皮（RPE）位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質和代謝終產(chǎn)物轉運通道；主要是由單層色素上皮細胞所構成，排列十分規(guī)則。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形，細胞分為三部分，即頂部、體部和基底部。視網(wǎng)膜色素上皮細胞無再生能力，細胞死亡后不被替換，而是鄰近的細胞向側面滑動，以填補死亡細胞遺留下來的空間。視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質和代謝終產(chǎn)物轉運通道。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。
方法簡介：
公司實驗室分離的兔視網(wǎng)膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的兔視網(wǎng)膜色素上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠牙本質涎0蛋白 英文名稱： Mouse Dein Sialophosphoprotein 規(guī)格： 英文縮寫： DSP
小鼠DNA抗體 英文名稱： Mouse Deoxyribonucleic Acid Aibody 規(guī)格： 英文縮寫： DNA.Ab
小鼠氧化酶 英文名稱： Mouse Diamine Oxidase 規(guī)格： 英文縮寫： DAO
小鼠多巴胺受體D1 英文名稱： Mouse Dopamine receptor D1 規(guī)格： 英文縮寫： DRD1
小鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat calmodulin (CAM) ELISA Kit 大鼠鈣調素(CAM)試劑盒
Humanverylateappearingaigen,VLAELISAKit 人遲現(xiàn)抗原(VLA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
C3試劑盒鮭魚補體蛋白3規(guī)格：96T/48T
魚類受精卵細胞凍存試劑盒(低溫)50次
MouseInsulin,INSELISAKit小鼠胰島素(INS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
6號染色體開放閱讀框72抗體
氣味結合蛋白2A抗體
HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原 0.5mgPACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原)
MANF重組人 MANF / ARMET 蛋白 Protein
CD47 Protein Human 重組人 CD47 蛋白 (Fc 標簽)
ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His & Fc 標簽)
PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原 0.5mgPACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原)
CD47 Protein Human 重組人 CD47 蛋白 (Fc 標簽)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His & Fc 標簽)
MANF重組人 MANF / ARMET 蛋白 Protein
兔視網(wǎng)膜色素上皮細胞大鼠降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒 ，英文名： FDP ELISA Kit
Pla zeatin riboside (ZR) ELISA Kit 植物玉米素核苷(ZR)試劑盒
Mousemacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 小鼠巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit人晚期糖基化終末產(chǎn)物
細胞HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitC3a大鼠補體片斷3a
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
