服務熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:730
更新時間:2024-11-05
人臍帶血造血干細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
臍帶血 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X8301 |
細胞簡介:
人臍帶血造血干分離自臍帶血;臍帶血是胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn),臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統(tǒng)的造血干細胞,可用于造血干細胞移植,因此,臍帶血已成為造血干細胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細胞,干細胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細胞,結出各種不同的果實——血液細胞、神經(jīng)細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量,又可進一步分化為各種組織細胞,從而在組織修復等方面發(fā)揮積極作用。造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞,終生成各種血細胞成分,包括紅細胞,白細胞和血小板。造血干細胞需要根據(jù)機體的生理需求適時的補充血液系統(tǒng)各個成熟細胞組分。同時在損傷、炎癥等應激狀態(tài)下,造血干細胞也扮演著調(diào)節(jié)和維持體內(nèi)血液系統(tǒng)各個細胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中,造血干細胞移植廣泛應用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病,在其它實體瘤的治療中,比如淋巴瘤,生殖細胞瘤,乳腺癌,小細胞肺癌,主要應用于常規(guī)治療失敗或復發(fā)難治以及具有不良預后因素的患者。造血干細胞以不對稱有絲分裂方式進行增殖,一個干細胞分裂產(chǎn)生兩個子細胞,一個分化為造血祖細胞,另一個則保持干細胞特征。造血干細胞在不斷體外培養(yǎng)產(chǎn)生大量造血祖細胞同時,保持自己既不增殖也不分化。體外培養(yǎng)微環(huán)境合適,造血干細胞可持續(xù)維持培養(yǎng) 60 天左右。 造血干細胞體外增殖培養(yǎng)需要基質(zhì)細胞滋養(yǎng)(滋養(yǎng)層細胞),缺少滋養(yǎng)層細胞不增殖,無法長期培養(yǎng),本產(chǎn)品為收集培養(yǎng)好的造血干懸浮細胞灌裝發(fā)貨,不包含滋養(yǎng)層,因此收貨后建議盡快實驗。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的人臍帶血造血干采用采集臍帶血、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的人臍帶血造血經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、SCF、IL-3、TPO、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態(tài):圓形
傳代特性:不建議傳代
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人臍帶血造血干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒 兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒、兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔子主要組織相容性復合體Ⅲ類試劑盒 兔子主要組織相容性復合體Ⅲ類試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子主要組織相容性復合體Ⅲ類試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子主要組織相容性復合體Ⅲ類試劑盒、兔子主要組織相容性復合體Ⅲ類eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔子壞死因子相關凋亡誘導配體3試劑盒 兔子壞死因子相關凋亡誘導配體3試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子壞死因子相關凋亡誘導配體3試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子壞死因子相關凋亡誘導配體3試劑盒、兔子壞死因子相關凋亡誘導配體3eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人胎兒 人胎兒 規(guī)格型號:96T/48T 人胎兒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人胎兒、人胎兒血紅蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠補體片斷3b(C3b)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat prostatic acid phosphatase (PAP) ELISA Kit 大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)試劑盒
HumanFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 人FMS樣酪激酶3(Flt3)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBonemorphogeneticprotein2,BMP-2試劑盒人骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總巰基含量比色法定量試劑盒20次
HumanSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit人基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒規(guī)格:96T/48T
KLRA1(Ly-49a)抗體
順氯氨鉑耐藥相關蛋白9抗體
IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (Fc 標簽) Protein
NKG2D(natural killer cell group 2D 0.5mgNKG2D(natural killer cell group 2D) NK細胞受體/自然殺傷細胞活化性受體
WFIKKN2重組人 WFIKKN2 / GASP-1 蛋白 Protein
FUOM Protein Human 重組人 FUOM / Fucose mutarotase / FucM / C10orf125 蛋白
CNTN1 Protein Mouse 重組小鼠 Contactin 1 / CNTN1 蛋白
NKG2D(natural killer cell group 2D 0.5mgNKG2D(natural killer cell group 2D) NK細胞受體/自然殺傷細胞活化性受體
FUOM Protein Human 重組人 FUOM / Fucose mutarotase / FucM / C10orf125 蛋白
IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CNTN1 Protein Mouse 重組小鼠 Contactin 1 / CNTN1 蛋白
WFIKKN2重組人 WFIKKN2 / GASP-1 蛋白 Protein
人臍帶血造血干細胞大鼠白蛋白(albumin)試劑盒 ,英文名: albumin ELISA Kit
Mouse compleme 4 (C4) ELISA Kit 小鼠補體蛋白4(C4)試劑盒
ELISA 小鼠MCP-3(mouse MCP-3) 進口分裝
CLIAKitforIL-21ELISAKit大鼠白介素21
通用型科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitPAF大鼠血小板活化因子