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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠腎小管上皮細(xì)胞 人毛囊干細(xì)胞 LIX1抗體 小鼠軟骨細(xì)胞 有絲分裂著絲粒相關(guān)驅(qū)動(dòng)蛋白抗體 小鼠肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞 KIAA2013蛋白抗體 RT4-D6P2T大鼠神經(jīng)鞘瘤細(xì)胞
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：692
更新時(shí)間：2024-11-05
產(chǎn)品特性Product characteristics
人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
外周血 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形、梭形、多角形，形態(tài)多樣 | YS-01X8307 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人外周血DC分離自外周血，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未 成熟樹突狀細(xì)胞，典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長(zhǎng)，在GM- CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突，胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強(qiáng)的遷移能力，伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成，多數(shù)呈懸浮生長(zhǎng)， 細(xì)胞呈圓形，細(xì)胞體積進(jìn)一步增大，表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 )，伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無(wú)特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志，主要通過(guò)形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng) 答，不能激活T細(xì)胞的第二信號(hào)，可導(dǎo)致T細(xì)胞無(wú)能，從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低，一般在30%以下。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血未成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過(guò)程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、 細(xì) 胞形態(tài)等綜合鑒定，純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài)：圓形、梭形、多角形，形態(tài)多樣
傳代特性：屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
人外周血樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
鹽酸甜菜堿 100g
Betaine,Hydrochloride 500g
BEZ235 (NVP-BEZ235) 50mg
BEZ235(NVP-BEZ235) 100mg
鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neuronal nuclear aibody type 2 / ai Ri aibody (ANNA-2/Ri) ELISA Kit 人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)試劑盒
Humanhemeoxygenase2,HO-2ELISAKit 人血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAChE(HumanAcetylcholinesterase)ELISAKit人乙酰酯酶
藥片抗壞血酸比色法定量試劑盒20次
MousePhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit小鼠0脂酶A2(PL-A2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
NADH復(fù)合體1抗體
髓過(guò)氧化物酶抗體
OLR1重組大鼠 OLR1 / LOX1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3 0.5mgEAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質(zhì)細(xì)胞谷運(yùn)載蛋白3抗原
SRPK3重組人 STK23 / MSSK1 / SRPK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CANT1 Protein Human 重組人 CANT1 蛋白
CRP Protein Mouse 重組小鼠 CRP / C-Reactive 蛋白
EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3 0.5mgEAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質(zhì)細(xì)胞谷運(yùn)載蛋白3抗原
CANT1 Protein Human 重組人 CANT1 蛋白
OLR1重組大鼠 OLR1 / LOX1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CRP Protein Mouse 重組小鼠 CRP / C-Reactive 蛋白
SRPK3重組人 STK23 / MSSK1 / SRPK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)大鼠δ基乙酰脫水酶(ALAD)試劑盒 ，英文名： ALAD ELISA Kit
Rabbit ai neuophil granules aibody (ANGA) ELISA Kit 兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w(ANGA)試劑盒
ELISA 小鼠巨噬細(xì)胞游走抑制因子(mouse MIF) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-1sRI(Rabbitsolubleierleukin-1receptorI)ELISAKit兔子白介素1可溶性受體I
通用型辣椒輕斑駁病毒(PepperMildMottleVirus;PMMV)試劑盒20次
ELISAKitTM大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白
