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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔表皮角化細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
兔表皮角化細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠腎小球上皮細(xì)胞 兔膀胱平滑肌細(xì)胞 視覺抑制蛋白抗體 人鼻粘膜上皮細(xì)胞;HNEpC 半乳糖凝集素1抗體 NPC/HK-1人鼻咽癌細(xì)胞 前列腺素E受體4相關(guān)蛋白抗體 CATH.a（小鼠神經(jīng)細(xì)胞）
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：838
更新時(shí)間：2024-11-05
產(chǎn)品特性Product characteristics
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：兔表皮角化細(xì)胞
組織來源：皮膚
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔表皮角化體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
兔表皮角化分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細(xì)胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過程中，分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細(xì)胞層。隨著向表層的推移，細(xì)胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔表皮角化先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔表皮角化經(jīng)PCNA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：
總/氧化型（T-GSH/GSSG）含量測(cè)定試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
過氧化物酶（GPX）試劑盒 DTNB法 50管/48樣
過氧化物酶（GPX）試劑盒 GR法 50管/48樣
硫氧還蛋白過氧化物酶（TPX）試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA 試劑盒
Human melanocyte stimulating hormone (MSH) ELISA Kit 人黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)試劑盒
RabbitHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforapo-A1ELISAKit大鼠載脂蛋白A1
血清/血漿總膽汁酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
PorcineLaminin,LNELISAKit豬層連蛋白/板層素(LN)試劑盒
RALGPS1蛋白抗體
細(xì)胞表面趨化因子受體7抗體
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 (HA1+HA2, cleavage) (His 標(biāo)簽) Protein
phospho-FAK(pSer732 0.5mgphospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 0酸化粘著斑激酶抗原
SEMA5A重組人 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BTN3A3 Protein Human 重組人 BTN3A3 蛋白
CTSC Protein Human 重組人 Cathepsin C / CTSC / DPPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)
phospho-FAK(pSer732 0.5mgphospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 0酸化粘著斑激酶抗原
BTN3A3 Protein Human 重組人 BTN3A3 蛋白
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 (HA1+HA2, cleavage) (His 標(biāo)簽) Protein
CTSC Protein Human 重組人 Cathepsin C / CTSC / DPPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SEMA5A重組人 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
兔表皮角化細(xì)胞大鼠β羥(βOHB)試劑盒 ，英文名： βOHB ELISA Kit
Rabbit immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 兔子免疫球蛋白A(IgA)試劑盒
ELISA 小鼠神經(jīng)生長因子(mouse NGF) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-12/P70(HumanIerleukin12)ELISAKIT人白介素12
通用型馬鈴薯Y病毒(PotatoVirusY;PVY)試劑盒20次
ELISAKitANG-1大鼠血管生成素1
收到細(xì)胞如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
