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廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
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更新時(shí)間:2024-11-05
兔小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
小腸 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8452 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔小腸血管內(nèi)皮分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門(mén)與胃相通,下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連,是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤(pán)曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門(mén),下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過(guò)小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過(guò)程,同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開(kāi)口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動(dòng)功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動(dòng)的動(dòng)力,促使食物向下運(yùn)動(dòng)。血管內(nèi)皮細(xì)胞除了吞噬異物、細(xì)菌、壞死和衰老的組織等,還參與集體免疫活動(dòng),包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動(dòng)脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內(nèi)皮細(xì)胞亦控制一些物質(zhì),如白血球進(jìn)出血管。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔小腸血管內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔小腸血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔小腸血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
三0酸腺苷酶 英文名稱(chēng): Adenosine iphosphate 英文縮寫(xiě): ATP
血管緊張素Ⅱ一型受體抗原 英文名稱(chēng): Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen 英文縮寫(xiě): AT1R
抗血管緊張素‖受體︱型自身抗體 英文名稱(chēng): Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies 英文縮寫(xiě): AT1R-AA
血管緊張素Ⅰ 英文名稱(chēng): AngiotensinⅠ 英文縮寫(xiě): ANGⅠ
9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框79抗體
γS-crystallin蛋白抗體
SERPINA3C重組小鼠 SerpinA3c 蛋白 Protein
CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗原 0.5mgCCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗原
LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 Protein
IL17RB Protein Human 重組人 IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Flag 標(biāo)簽)
ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (Fc 標(biāo)簽僀
CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗原 0.5mgCCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗原
IL17RB Protein Human 重組人 IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Flag 標(biāo)簽)
SERPINA3C重組小鼠 SerpinA3c 蛋白 Protein
ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 Protein
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 ,英文名: IgE ELISA Kit
Human low density lipoprotein receptor related protein 6 (LRP-6) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)試劑盒
MonkeySolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforBid(HumanBH3ieractingdomaindeathagonist)ELISAKit人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白
細(xì)菌尿素瓊脂平板50個(gè)
RabbitLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit兔鉤端IgG(LepIgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)試劑盒 ,英文名: PKIβ ELISA Kit
L selectin (L-Selectin/CD62L) ELISA Kit 人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑
RatIerleukin3,IL-3ELISAKIT 大鼠白介素3(IL-3)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforCyclin-D2(MouseCyclin-D2)ELISAKit小鼠細(xì)胞周期素D2
細(xì)胞色素P450亞酶CYP2C8(DBF)活性熒光定量試劑盒20次
Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10ELISAKit大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10(FGF-10)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行