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更新時(shí)間:2024-11-05
兔腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腎 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8426 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔腎動(dòng)脈內(nèi)皮分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎動(dòng)脈的分支為葉間動(dòng)脈,穿行于腎柱內(nèi),上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,形成與腎表面平行的弓狀動(dòng)脈。小葉間動(dòng)脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管,并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動(dòng)脈,進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng),再匯集成出球小動(dòng)脈,出腎小體。直小動(dòng)脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動(dòng)脈既是腎的營(yíng)養(yǎng)血管,又是腎的機(jī)能血管,與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān)。腎動(dòng)脈在腎實(shí)質(zhì)內(nèi)形成兩個(gè)毛細(xì)血管網(wǎng):腎小球毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過(guò)形成原尿;球后毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是腎動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有:①在血漿濾過(guò)形成原尿的過(guò)程中起重要作用,②在腎小管的重吸收過(guò)程中起重要作用,③保持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔腎動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
整合素α2β1 英文名稱: Iegrin α2β1 英文縮寫: Iegrin α2β1
整合素α5β3 英文名稱: Iegrin α5β3 英文縮寫: Iegrin α5β3
β-整合素 英文名稱: β-Iegrin 英文縮寫: β-Iegrin
誘導(dǎo)型合酶 英文名稱: induced niic oxide syhas 英文縮寫: iNOS
轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體
胞吞蛋白Endophilin 2抗體
CADM3重組小鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Beta-Amyloid (31-35 0.1mgBeta-Amyloid (31-35) β淀粉樣肽31-35(多肽蛋白)
TXNL4B重組人 Dim2 / TXNL4B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACPP Protein Human 重組人 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LIFR Protein Rat 重組大鼠 LIFR僀?僀
Beta-Amyloid (31-35 0.1mgBeta-Amyloid (31-35) β淀粉樣肽31-35(多肽蛋白)
ACPP Protein Human 重組人 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CADM3重組小鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
LIFR Protein Rat 重組大鼠 LIFR 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TXNL4B重組人 Dim2 / TXNL4B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
植物激素脫落酸(ABA)ELISA 試劑盒
Human ai RNP aibody (RNP-Ab) ELISA Kit 人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)試劑盒
Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)試劑盒分裝
CLIAKitforAFA(Humanai-filaggrinaibody)ELISAKit人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體
血液氧化型(GSSG)濃度比色法定量試劑盒50次
MousesubstancePreceptor,SP-RELISAKit小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)試劑盒
兔腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒
Rat basic fibroblast growth factor 6 (bFGF-6) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)試劑盒
HumanfibrinopeptideA,FPAELISAKit 人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)試劑盒分裝
Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2α試劑盒人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)試劑盒
正常大鼠(SpragueDawley)肝組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升
Mouseai-IVIgGaibodyELISAKit小鼠抗IVIgG抗體試劑盒
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